从药物开发、再生医学和即时诊断,到生物传感器开发和免疫或癌症的生物学研究,基于活细胞的检测方法在各种应用中都极具价值。自2013年发表第一项研究以来,MP-SPR技术已成为研究活细胞的一种有价值的工具,可以替代荧光显微镜或流式细胞术等传统方法。虽然使用传统SPR仪器进行的细胞研究很少,但在最近的一些研究中,MP-SPR能够阐明纳米颗粒摄取动力学、药物吸收途径和GPCR激活谱。
MP-SPR是市场上少有的允许活细胞的生物学相关反应,同时保持这些活模型的复杂性的实时技术。使用MP-SPR,根据研究需要,活细胞测定可采用以下两种主要方法:
1、在传感器表面生长细胞
使用标准细胞培养方案在传感器表面培养细胞,样品分析物(纳米颗粒,药物化合物)被引入到流程中,对分析物的实时细胞反应进行评估,并阐明细胞激活或细胞摄取概况。这种方法有助于研究:
a、给定药物化合物的吸附路线
b、药物递送的最佳纳米颗粒
c、活细胞样品最大有效浓度(EC50)的一半
d、纳米颗粒或病毒进入细胞的方式
MP-SPR技术已经成功地进行了基于细胞的分析,分析物范围从小分子药物化合物、激素和蛋白质,到无机纳米颗粒、脂质体和细胞外囊泡。
2、在传感器表面注入活细胞
活细胞被引入流过传感器表面的液体(细胞介质)中,表面用给定的表面涂层(如脂质膜)或表面配体(受体)修饰。该方法适用于结合/粘附研究,并提供以下信息:
a、细胞对表面受体(如肽)的亲和力
b、细胞附着涂层的动力学特征
c、结合细胞与表面的分离
d、给定细胞群的表面特异性
e、表面的最佳防污或抗菌性能
MP-SPR技术已经在细胞和细菌中进行了探索,使用不同的涂层,如羟基磷灰石、脂质膜、聚合物,并使用各种配体(如肽、抗体和蛋白质复合物)进行功能化。
3、MP-SPR面对活细胞的其他优势:
a、适用于多种活细胞
b、无标签的实时结合/粘附研究
c、扩展数据集从细胞响应在样本加载
d、灵活选择细胞兼容的表面
e、测量期间保持的生理相关条件
f、MP-SPR与电化学和荧光的结合