为了开发癌症疫苗，用多参数表面等离子体共振(MP-SPR)测量了病毒与肽的相互作用。用多肽包被病毒以提高病毒的免疫原性。溶瘤腺病毒(OAds)附着在传感器表面。实时测量oad附着的肿瘤特异性主要组织相容性复合体(MHC)肽。修饰的阳性多聚k -SIINFEKL肽与病毒表面结合(结合常数为2.88 × 10^-6M)，而未修饰的中性SIINFEKL肽不结合。

简介

       除了疫苗研究外，病毒作为药物传递的纳米载体也得到了广泛的研究，而且用纳米生物传感器检测病毒用于诊断的研究也很活跃。在所有的研究中都需要实时和无标签的方法。

多参数表面等离子体共振是一种实时无标签的方法，用于测量分子结合。它独特的光学装置可以测量引起小信号变化的小分子，也可以测量包括纳米颗粒和病毒在内的大分子。

材料和方法

       清洗后的BioNavis二氧化硅(SiO₂)传感器载玻片外涂有APTES((3-氨基丙基)三乙氧基硅烷)，然后将溶瘤腺病毒原位固定在传感器表面(图1)。测量通道涂有病毒，而第二通道用作参考通道，不含病毒。用20 mM CHAPS(3-[(3-胆酰胺丙基二甲酰胺]-1-丙磺酸)清洗两个通道，然后将多肽PolyKSIINFEKL或SIINFEKL平行注入两个流动通道，并增加浓度。中性SIINFEKL是肿瘤特异性主要组织相容性复合体(MHC)肽I类表位，来源于鸡卵白蛋白和polyK -SIINFEKL含有额外的聚赖氨酸(polyK)链，可在中性pH下将肽的净电荷增加到+6 mV。

       测量采用MP-SPR Navi™220A NAALI仪器，角扫描测量模式，流速为30 μL/min，温度为20℃。

结果和讨论

       修饰的带正电荷的PolyK-SIINFEKL在oad上的吸附表现出浓度依赖性，而未修饰的中性SIINFEKL不与病毒结合(图2)。PolyK-SIINFEKL的结合常数为2.88 x 10^-6 M。

       在未来，用于病毒包被的肽可以是mhc - 1表位或患者来源的肿瘤表位，以利用腺病毒的天然免疫原性和开发针对肿瘤特异性免疫反应的个体化药物。

       使用MP-SPR可以利用各种实验装置进行病毒相互作用测量。如图3所示，病毒可以像这里描述的那样附着在传感器表面(作为配体)或中间所示，它们可以在液体流动中自由移动(作为分析物)，而靶标在表面或细胞可以附着在传感器表面。与此同时，病毒正在进入细胞，如图所示。如利用MP-SPR技术研制玉米绿斑病毒(MCMV)检测生物传感器时，以病毒为分析物。

结论

       使用MP-SPR可以实时测量病毒与分子、细胞或物质的相互作用，无需任何标记。MP-SPR独特的光学设置提供了有关相互作用动力学和结合强度的宝贵信息。MP-SPR专门涵盖了从病毒-靶标相互作用，到病毒-脂质一直到病毒-细胞相互作用的整个过程，从而为个性化医疗铺平了道路。